date:2023-06-09 15:20:43
神經科學是一個多學科領域,專注于神經系統的發育、組織、功能和疾病。
在分子和細胞水平上研究神經系統(NS)對于理解神經疾病的發展及其治療至關重要。ibidi為細胞培養和顯微鏡研究神經細胞在體外生理條件下的形態、功能和行為提供了不同的解決方案。
大鼠背根神經節細胞和雪旺細胞,在ibidi μ-Slide 8 Well中培養,并對神經絲(綠色)、NGFR(品紅色)和 DAPI(白色)進行染色。該圖像是使用 LEICA SP8X 激光掃描顯微鏡獲得的。圖片來源:Tamara Weiss, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, Medical University of Vienna, Austria
神經細胞分析
神經細胞分析研究構成神經系統的不同細胞類型的特征、功能和相互作用。神經系統由多種類型的細胞組成,包括神經元、神經膠質細胞和干細胞,每種細胞具有不同的作用和功能。
顯微鏡是研究神經細胞和深入了解神經系統形態、結構和動力學的關鍵技術。雖然組織學樣本(如腦切片)的制備和成像在19世紀后期已經成為可能,但過去50年先進成像技術的發展,如共聚焦顯微鏡和雙光子顯微鏡,已經推動了組織學的可視化神經元結構和過程。新抗體、熒光探針和標記技術的結合使得在固定樣本(例如,在免疫熒光分析中)以及在活細胞、組織或生物體中描繪不同的神經元成分及其復雜的相互作用網成為可能。
最近,隨著超分辨率顯微鏡的發明及其克服光衍射屏障(~200 nm)的能力,甚至可以看到小到突觸囊泡(尺寸為40nm)的結構。
可以使用 live cell imaging活細胞成像技術在生理條件下實時研究動態細胞過程,如:突觸形成、軸突生長和樹突棘動力學。
綜上所述,成像技術的最新進展使得神經元過程和形態的可視化具有高時空分辨率,這在理解大腦和神經的功能方面發揮著重要作用。
在ibidi μ-Plate 96孔板中源自人誘導多能干細胞 (iPSC) 的多巴胺神經元的免疫熒光圖像。該圖顯示神經突延伸以及 β-III 微管蛋白(綠色)和酪氨酸羥化酶(紅色)的表達。DAPI(藍色)用于核染色。
圖片由Image Courtesy: Asuka Morizane, Center for iPS Cell Research and Application, Kyoto University, Kyoto, Japan提供
ibidi為神經科學研究做出的貢獻:
ibidi開發的解決方案和產品可促進涵蓋神經生物學研究不同方面的各種細胞培養測定。
使用ibidi產品的神經相關文獻已超過9000份。
這些產品包括具有各種幾何形狀和涂層的實驗室器皿,為培養和成像甚至復雜的培養神經元細胞提供理想的表面。此外,ibidi Stage Top Incubators培養箱和ibidi Pump System泵/流體剪切力系統是多功能工具,可以在生理條件下培養細胞,從而實現神經元細胞的長期活細胞成像。
解決方案
ibidi為神經細胞分析提供的解決方案:
ibidi μ-Slides 和 μ-Dishes 包括不同的幾何形狀,結合了日常細胞培養和功能性細胞檢測的最佳條件。它們是免疫熒光、活細胞成像和高分辨率顯微鏡的理想選擇。ibidi實驗室器皿具有 ibidi Polymer Coverslip 聚合物蓋玻片和 ibidi Glass Coverslip 玻璃蓋玻片。
ibidi channel slides 通道載玻片,尤其是μ-Slide VI 0.4 六通道載玻片,特別適用于免疫熒光染色:它們的幾何形狀非常適合精確交換少量介質,這在免疫細胞化學染色過程中是必需的。通道幾何形狀非常適合小體積免疫熒光測定。
Chamber Slides, removable可拆卸/可移除腔室載玻片,是低通量和高通量免疫熒光實驗的理想選擇,適用于長期儲存用玻璃蓋玻片固定的樣品。
ibidi μ-Plates 是高通量藥物篩選和大規模敲低和過表達實驗的理想選擇,具有高分辨率顯微鏡讀數。這些成像板與使用 ANSI/SLAS (SBS) 標準格式的機器人和讀板機兼容。ibidi μ-Plates 有24、96和384孔板,有 ibidi Polymer Coverslip 聚合物蓋玻片和 ibidi Glass Coverslip 玻璃蓋玻片,其自發熒光極低,可用于無干擾熒光顯微鏡檢查。
ibidi Stage Top Incubators 培養箱為每個標準倒置顯微鏡上的活細胞成像提供生理條件。包括CO2和O2的控制(如:用于缺氧實驗)以及主動控制濕度??捎糜谳d玻片、培養皿以及多孔板。
用戶評論
“μ-Slide 8 Well high 八孔高壁腔室載玻片效果非常棒,尤其是對于我們的iPSC衍生神經元。我們將它們用于活細胞顯微成像,結果非常好。我們對載玻片非常滿意!” Federica Bono, University of Brescia, Italy
“我們測試了μ-Slide 8 Well high Grid-500八孔高壁500um格子底腔室載玻片,將其作為長期實驗的新選擇。為了用不同的涂層成分檢查表面,我們接種神經元祖細胞(從第16天開始),并根據我們的分化方案培養它們。我們很高興地發現,這些細胞現在已經培養超過60天,并且發育得很好。我們注意到,Vitrogel和Geltrex涂層都與載玻片的表面形成了穩定的結合,并且沒有脫離。”Robin Friedrich, Hamm-Lippstadt University of Applied Sciences, Germany
ibidi μ-Slide 8 Well high Grid-500神經元祖細胞的活細胞成像圖像。圖片顯示第50天分化的神經元。圖片由Robin Friedrich, Hamm-Lippstadt University of Applied Sciences, Germany提供
參考文獻
Immunofluorescence of Neuronal Cells
The μ-Slide 8 Well was used for the cultivation and immunostaining of rat Schwann cells (rSC), fibroblasts (rFB), and dorsal root ganglion (rDRG) neurons.
Millesi F, Weiss T, Mann A, Haertinger M, Semmler L, Supper P, Pils D, Naghilou A, Radtke C. Defining the regenerative effects of native spider silk fibers on primary Schwann cells, sensory neurons, and nerve-associated fibroblasts. FASEB J. 2021 Feb;35(2):e21196. doi: 10.1096/fj.202001447R.
Imaging of Neuronal CAD Cells
The μ-Dish 35mm, high was used to culture and immunostain neuronal CAD (Cath.a-differentiated) cells to quantify tunneling nanotubes connected cells (TNT) and filopodia connected cells, as well as to image the transfer of DiD-labelled vesicles between two cell populations.
Bhat S, Ljubojevic N, Zhu S, Fukuda M, Echard A, Zurzolo C. Rab35 and its effectors promote formation of tunneling nanotubes in neuronal cells. Sci Rep. 2020 Oct 8;10(1):16803. doi: 10.1038/s41598-020-74013-z.
Live Cell Imaging of Cortical Neurons
The μ-Slide 8 Well was used for confocal live cell imaging of Purkinje neurons.
Motori E, Atanassov I, Kochan SMV, Folz-Donahue K, Sakthivelu V, Giavalisco P, Toni N, Puyal J, Larsson NG. Neuronal metabolic rewiring promotes resilience to neurodegeneration caused by mitochondrial dysfunction. Sci Adv. 2020 Aug 28;6(35):eaba8271. doi: 10.1126/sciadv.aba8271.